ER-Tracker Red

Az ER-TrackerRed (Endoplasmic ReticulumRed Fluorescent Probe) a BODIPY FL fluoreszcens festék és a glibenklamid kombinációja. A glibenklamid csoport kémiai szerkezetében, eredetileg a II-es típusú cukorbetegség kezelésére szolgáló gyógyszer, az endoplazmatikus retikulumon lévő ATP-érzékeny káliumcsatornák szulfonilurea-receptorához kötődik, így szelektíven lokalizálható az endoplazmatikus retikulumban, és endoplazmatikus retikulum-specifikusként használható. fluoreszcens szonda a sejtek endoplazmatikus retikulumának jelölésére. Az ER tracker red jó specificitású, nagymértékben szelektív az élő sejtek endoplazmatikus retikulumára, ritkán festi meg a mitokondriumokat, és alacsony citotoxicitású. Ez a próba részben megőrzi az élő sejtek festési jellemzőit a festés és rögzítés után.

Szárazjéggel szállítjuk; Tárolja -20 fokos fénytől védve 12 hónapig.

1. A vizsgálati munkaoldat elkészítése:

1.1. Ez a termék egy 1 mM-os tárolóoldat, amelyet a kísérlet előtt szobahőmérsékletre visszamelegítenek, és kis sebességgel rövid ideig centrifugálják, hogy a reagensek a cső aljára süllyedjenek;

1.2. 0.25-1 μM munkaoldatra hígítjuk az endoplazmatikus retikulum pufferrel (Hanks, PBS stb., Hanks ajánlott) vagy bazális tápközeggel (szérum nélkül) történő kimutatására;

2. Sejtfestés(a következő protokoll a tapadó sejtekre vonatkozik; a szuszpenziós sejtcseréhez centrifugálás szükséges)

2.1. A normál vagy kezelt sejteket minden alkalommal 1-2 alkalommal mossuk pufferrel 3-5 percig;

2.2. Adjunk hozzá előmelegített endoplazmatikus retikulum vizsgálati munkaoldatot, és inkubáljuk sejttenyésztő inkubátorban 37 fokon 20 percig (az inkubációs idő bizonyos mértékig beállítható a különböző sejttípusok és állapotok miatt);

2.3. Távolítsa el az endoplazmatikus retikulum vizsgálati munkaoldatot, és mosson pufferrel 2-3 alkalommal, egyenként 3-5 percig;

2.4. A vörös fluoreszcenciát (Ex=587 nm, Em=615 nm) fluoreszcens mikroszkóp alatt figyeljük meg, miután a filmet közvetlenül vagy fluoreszcens repedésgátló szerrel blokkoltuk (ajánlott G1401);

3. Sejtrögzítés (opcionális):

Jegyzet:Festés után ez a termék fixálható, de a fluoreszcens jel a fixálás után gyengül; nem perforálható feldolgozáshoz, és a perforáció a fluoreszcens jelölés eltűnéséhez vezet.

3.1. A megfestett és mosott kezelt sejteket hozzáadjuk a fixálóhoz (ajánlott G1101), és 5 percig szobahőmérsékleten fixáljuk;

3.2. Távolítsa el a fixálót, és mossa le pufferrel 2-3 alkalommal 3-5 percig minden alkalommal;

3.3. Mosás után a sejteket blokkolni, mikroszkóposan megvizsgálni, vagy kísérleti igényeknek megfelelően tovább lehet festeni.

1. A sejtek eltérő típusa és állapota miatt a festék munkakoncentrációja és az inkubációs idő megfelelően beállítható.

2. A szondát a festés után nem lehetett perforálni a kezeléshez, és a sejtfluoreszcencia szinte teljesen eltűnt a perforáció után.

3. A glibenklamid farmakológiai tulajdonságai befolyásolhatják az endoplazmatikus retikulum bizonyos funkcióit; a szulfonilurea-receptorok változó expressziója egyes speciális sejtekben szintén nem endoplazmatikus retikulum-specifikus festődést eredményezhet.

4. Élő sejtek festésekor és mosásakor a vizsgálati munkaoldatot és a mosópuffert elő kell melegíteni 37 fokra. A festést és a mosást inkubátorban való inkubálással hajtjuk végre, hogy ne befolyásoljuk a sejtek morfológiáját a hőmérséklet-különbség stimulálása révén.

5. A fluoreszcencia kioltásának megakadályozása érdekében a teljes festési folyamatot fénytől távol kell végezni.

6. A szonda mesterkeverékeit külön tartályokban kell tárolni, hogy elkerüljük az ismételt fagyasztást és felengedést. A pazarlás elkerülése érdekében a festőoldatot szükség szerint elkészítjük.

7. Egészsége és biztonsága érdekében, kérjük, viseljen laborköpenyt és kesztyűt a működés során.

Népszerű tags: er-tracker piros, kínai er-tracker piros gyártók, beszállítók, gyár