Coomassie Brilliant Blue G250

A Coomassie Brilliant Blue G250 gyorsan képes megkötni a fehérjéket. A Coomassie Brilliant Blue G250 maximális abszorpciója 488 nm szabad állapotban. A fehérjéhez való kötődés után a maximális abszorpció 595 nm-re változott. Az optikai abszorpciós érték arányos a fehérjetartalommal, így felhasználható a fehérje mennyiségi kimutatására. Ez a termék a G2001 Bradford Assay fehérje mennyiségi kimutatási készlet kiegészítéseként is használható.

Szállítás és tárolás szobahőmérsékleten, 12 hónapig érvényes.

1. (Opcionális) Standard görbe rajzolása (mikrolemez-leolvasó módszer): Oldja fel a BSA-t vízben 0,5 mg/ml fehérje standard munkaoldat elkészítéséhez. A fehérje standard munkaoldatot hozzáadjuk a 96-lyuklemezhez 0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20 μL szinten, majd a gradiens munkavégzést. az oldatot 20 μL-re kiegészítjük PBS-sel vagy sóoldattal. A fehérjekoncentráció gradiens görbéi 0, 25, 50, 100, 200, 300, 400 és 500 ug/ml. Ha csak relatív mennyiségi összehasonlításokat végzünk, akkor nincs szükség standard görbére.

2. A vizsgálandó minta előkészítése: A vizsgálandó fehérjemintát megfelelően hígítjuk (előkísérletekkel kimutatható, hogy a minta fehérjekoncentrációja a standard görbe tartományába esik, ezzel biztosítva a vizsgálati eredmény megbízhatóságát ), és minden mintából 20 μL-t adunk a 96-lyuklemezre. A vizsgálandó mintát ugyanabban az oldatban kell hígítani, mint a fehérjestandardot.

3. Kimutatás: 200 μL Coomassie briliánskék G250 oldatot adunk minden lyukba, és alaposan összekeverjük (a 96-lyuklemez 30 másodpercre az oszcillátorra helyezhető). Szobahőmérsékleten 3-5 perc elteltével a 0. számú standard görbét használjuk referenciaként, és a kolorimetriás mérést 595 nm hullámhosszon végezzük, és minden lyuk abszorbancia értékét rögzítjük.

4. Számítás: A standard görbe gradiens fehérjetartalmát (ug/mL) vesszük abszcisszaként, és a fényelnyelési értéket az ordináta a standard görbe megrajzolásához. A minta abszorbanciaértéke szerint a megfelelő lyukban mérendő minta fehérjekoncentrációja a standard görbén megtalálható (ug/mL), majd a minta hígításával megszorozva a tényleges fehérjekoncentráció a mérendő mintát.

5. Ezen túlmenően: ha spektrofotométert használunk a meghatározáshoz, akkor az üveg kémcsövet vagy az üveg kolorimetriás csövet alkalmazzuk reakcióedényként a standard görbék készítéséhez. A vizsgálandó fehérjeminta megfelelő hígítása után adja hozzá egy új, 1 ml-es mintaméretű üveg kémcsőbe vagy kolorimetriás csőbe. Adjon hozzá 3 ml Coomassie briliánskék G250 oldatot a standard görbe gradiens csőhöz és a mintacsőhöz, alaposan keverje össze, álljon szobahőmérsékleten 3-5 percig, majd használjon spektrofotométert a kolorimetriás kimutatáshoz.

6. Detektálás: A spektrofotométer hullámhosszát 595 nm-re állítjuk, és a standard görbét és a vizsgálandó mintát nullázzuk, referenciaként a standard görbe No. 0 csővel. A 4. lépésben leírtak szerint standard görbéket rajzolunk, és kiszámítjuk a vizsgálandó minták fehérjekoncentrációit.

1. Használat előtt a terméket vissza kell állítani szobahőmérsékletre, és fejjel lefelé kell keverni, hogy ne befolyásolja az érzékelés érzékenységét.

2. Biztonsága és egészsége érdekében viseljen védőszemüveget, kesztyűt vagy védőruházatot.

Csak kutatási célra!

Népszerű tags: coomassie brilliant blue g250, Kína coomassie briliánkék g250 gyártók, beszállítók, gyár