Termék bemutatása
|
Termék neve |
Macska. Nem. |
Spec. |
|
ECL kemilumineszcens szubsztrát reagens kombinált csomag |
G2161-200ML |
ECL kemilumineszcens szubsztrát reagenskészlet: 2×50 ml |
|
Érzékeny ECL kemilumineszcens szubsztrát reagenskészlet: 2×25 ml |
||
|
Túlérzékeny ECL lumineszcens szubsztrát reagenskészlet: 2×25 ml |
Termékleírás/Bevezetés
Ez a termék háromféle, különböző érzékenységű ECL kemilumineszcens szubsztrát reagensből áll: ECL kemilumineszcens szubsztrát reagens készlet, érzékeny ECL kemilumineszcens szubsztrát reagens készlet és túlérzékeny ECL kemilumineszcens szubsztrát reagens készlet. Az ECL kemilumineszcens szubsztrát reagens alapelve a luminol kemilumineszcenciáján alapul; reagálhat a másodlagos antitesthez kapcsolt torma-peroxidázzal (HRP) és fényt bocsát ki, amely röntgenfilmes expozícióval vagy más képalkotó módszerekkel (pl. fluoreszcens vagy kemilumineszcenciás képalkotó berendezés) kimutatható; a kimutatási határok nanogramm, pikogramm és femtogram, amelyek megfelelnek a különböző célfehérjékre vonatkozó expozíciós kísérletek igényeinek. Az érzékeny és túlérzékeny ECL kemilumineszcens szubsztrát reagens továbbra is képes detektálni a jeleket alacsony mintakoncentrációnál, megtakarítva a mintákat, és továbbra is képes detektálni a jeleket azonos alacsony koncentrációjú (elsődleges és másodlagos) antitesttel végzett inkubáció után, értékes antitesteket takarítva meg; a Sensitive ECL kemilumineszcens szubsztrát reagenskészlet jelértéke legalább 10-szer javult az ECL kemilumineszcens szubsztrát reagenskészlethez képest, és a túlérzékeny ECL lumineszcens szubsztrát reagenskészlet jelértéke legalább 10-szeres az érzékeny ECL kemilumineszcens szubsztrát reagenskészlethez képest.
Tárolási és szállítási feltételek
Hajó nedves jéggel; Tárolja 2-8 fokon fénytől távol, 12 hónapig érvényes.
Termékösszetevők
|
Alkatrész száma |
Összetevő |
G2161-200ML |
|
|
G2161-1 |
ECL kemilumineszcens szubsztrát reagens készlet |
ECL reagens A |
50 ml |
|
G2161-2 |
ECL reagens B |
50 ml |
|
|
G2161-3 |
Érzékeny ECL kemilumineszcens szubsztrát reagenskészlet |
Érzékeny ECL-reagens A |
25 ml |
|
G2161-4 |
Érzékeny ECL reagens B |
25 ml |
|
|
G2161-5 |
Túlérzékeny ECL lumineszcens szubsztrát reagens készlet |
Túlérzékeny ECL reagens A |
25 ml |
|
G2161-6 |
Túlérzékeny ECL reagens B |
25 ml |
|
|
Kézikönyv |
1 db |
||
Vizsgálati protokoll/eljárások
1. Használat előtt keverjen össze azonos térfogatú azonos érzékenységű ECL A-t és ECL B-t, hogy az ECL munkaoldat megfelelő érzékenységű legyen.
2. Western blot kísérletben a PVDF membránt (vagy NC membránt) másodlagos antitesttel inkubáljuk, többször mossuk, és a felesleges folyadékot szűrőpapír abszorbeálja. Helyezze a membránt két darab tiszta ragasztófólia (vagy PE-kesztyű) közé, és adjon hozzá ECL munkaoldatot, hogy befedje a membrán felületét. Ezt az eljárást óvatosan kell elvégezni, hogy elkerüljük a légbuborékok kialakulását a ragasztófólia és a PVDF membrán (vagy NC membrán) között.
3. Megfelelő reakció után a felesleges ECL munkaoldatot szűrőpapírral vagy itatópapírral eltávolítottuk, majd nyomás alatti lemezzel vagy fluoreszcens képalkotó berendezéssel.
4. A préselt fóliát előhívó és fixáló reagensekkel előhívjuk és rögzítjük (G2019 javasolt). Állítsa be az expozíciós feltételeket a fényerősségnek megfelelően.
Jegyzet
1. A pipettahegyeket ki kell cserélni az A és B ECL reagens folyadékátviteli folyamata során. Az A és B reagens keresztszennyeződése fokozatos meghibásodáshoz vezet.
2. Kérjük, viseljen kesztyűt és tiszta felszerelést, például csipeszt, hogy elkerülje a külső fehérjék és fémionok általi szennyeződést a membránnal való érintkezés során.
3. A nátrium-azid gátolja a HRP aktivitását, és minden kapcsolódó reagenst kerülni kell.
4. Az eredmények pontosságának befolyásolása érdekében kérjük, használja fel az ECL munkaoldatot egy napon belül, ne hagyja másnapra.
5. Kérjük, használat után szorosan zárja le az üveget, és tartsa távol a fénytől, hogy elkerülje a meghibásodást; különösen a B reagens, amely oxidálószereket tartalmaz, és könnyen redukálható és hatástalanná válik.
6. Az ECL kemilumineszcenciás szubsztrát reagenskészlet kiválasztása lásd az 1. táblázatot, az elsődleges antitest és a másodlagos antitest ajánlott hígítási arány vizsgálati adatai önkutatású antitestből származnak
7. Az ECL kemilumineszcens assay általános problémáit és megoldásait a II. táblázat tartalmazza.
8. Az A és B ECL reagens káros az emberi szervezetre, ügyeljen a hatékony védelemre, kerülje az emberi testtel való közvetlen érintkezést vagy a légutak belélegzését.
9. Biztonsága és egészsége érdekében viseljen védőszemüveget, kesztyűt vagy védőruházatot.
1. táblázat: ECL kemilumineszcenciás szubsztrát reagenskészlet-kiválasztás referenciatáblázata
|
Termék neve |
ECL kemilumineszcens szubsztrát reagenskészlet |
Érzékeny ECL kemilumineszcens szubsztrát reagenskészlet |
Túlérzékeny ECL kemilumineszcens szubsztrát reagenskészlet |
|
Macska. Nem. |
G2014 |
G2074 |
G2020 |
|
Észlelési határ |
Nanogram szint |
Picogram szint |
Femtogram szint |
|
Az elsődleges antitest javasolt hígítási aránya (1 mg/ml tároló oldat) |
1:1000-1:5000 |
1:4000-1:10000 |
1:10000-30000 |
|
A másodlagos antitest javasolt hígítási aránya (1 mg/ml tároló oldat) |
1:1000-1:6000 |
1:3000-1:60000 |
1:6000-150000 |
|
Jellemzők és alkalmazhatóság |
Széles választék és alkalmazhatóság |
Széles tartomány és alkalmazhatóság, nagy érzékenység, közepes fehérjebőség, megtakarító antitest |
Rendkívül érzékeny, alacsony fehérjebőség, alacsony vagy értékes antitest titer |
2. táblázat: Az ECL kemilumineszcencia-detektálás gyakori problémái és megoldásai
|
Gyakori probléma |
Lehetséges ok |
Lehetséges megoldás |
|
Magas háttér (magas háttér vagy nincsenek meghatározott sávok) |
Elsődleges és másodlagos antitesthígítás a megfelelő puffer és koncentráció használata nélkül |
Megfelelően csökkentse a hígítási arányt, csökkentse az elsődleges és másodlagos antitestek koncentrációját |
|
A blokkolási idő vagy a mosási idő túl rövid, vagy a blokkoló megoldás nem megfelelő |
A foszforilált fehérje kimutatását BSA-val vagy fehérjementes blokkolóoldattal kell blokkolni. Minél kisebb a membrán pórusmérete, annál hosszabb a blokkolás és az eluálási idő |
|
|
Az elsődleges antitest nincs teljesen inkubálva. |
Megfelelően hosszabbítsa meg az inkubációs időt (kellezze egy éjszakán át 4 fokon) |
|
|
Gyenge vagy nincs jel |
Az elsődleges és/vagy másodlagos antitest-koncentráció túl alacsony |
Növelje az elsődleges és másodlagos antitestek koncentrációját |
|
Alacsony fehérjebőség |
Növelje a minta térfogatát |
|
|
Váltson nagyobb érzékenységű ECL kemilumineszcens készletre |
||
|
A fluoreszcencia gyorsan kialszik, és megjelenik egy üreges sáv (szellemsáv). |
A célsáv fluoreszcenciája túl erős, ami gyorsan felemészti a világító hordozót. Az aljzat elfogyasztása után fehérnek tűnik. |
Csökkentse a fehérje mennyiségét vagy az elsődleges és másodlagos antitestek mennyiségét. |
|
Barna vagy sárga csíkok jelennek meg a membránon |
A HRP enzim tartalma a célterületen túl gazdag, ami nagyszámú szabad gyököt termel, ami a HRP enzim oxidációs inaktiválásához vezet. |
Csökkentse a fehérjeminták vagy az elsődleges és másodlagos antitestek mennyiségét. |
Csak kutatási célra!
Verzió: v1.0-202308
Népszerű tags: ecl kemilumineszcens szubsztrát reagens kombinált csomag, Kína ecl kemilumineszcens szubsztrát reagens kombinált csomag gyártók, beszállítók, gyár

