Növényi hidrogén-peroxid festőfolyadék (DAB)

A növényi szövetek különféle reaktív oxigénfajokat (ROS) termelnek stressz körülmények között. A ROS aktivitása nagyon nagy és rendkívül instabil, így a ROS kimutatása általában a végtermékeitől függ. A hidrogén-peroxid a reaktív oxigénfajták egyik fajtája. A kataláz által katalizált hidrogén-peroxid gyorsan reagálhat DAB-val (3, 3-diaminobenzidin-tetrahidroklorid), és barnásvörös vegyületet képez, és így lokalizálja a hidrogén-peroxidot a szövetekben. Az alapelv szerint DAB módszernek is nevezik. A fenti elv alapján ezt a terméket növényi élő szövetek hidrogén-peroxidos festésére használják. Általában a gyökércsúcsokra, levelekre és egyéb általános festésre alkalmazzák, a festés után a hidrogén-peroxid felhalmozódási helye barnától sötétbarnáig terjed.

Nedves jég szállítása; Tárolás 2-8 fokon, 12 hónapig érvényes.

1. Reagens előkészítés: 100 mg DAB-t teljesen feloldottunk 100 ml foszfát pufferben, így DAB festő munkaoldatot kaptunk, amelyet 4 fokon fény alatt tároltunk és egy héten belül hatásos volt. Megjegyzés: A DAB érzékeny a fényre, és az oldódási folyamat során óvni kell a fénytől. Ha nehezen oldódik, ultrahangos és mágneses keveréssel elősegíthetjük az oldódást.

2. Gyűjtsük össze a stressznek kitett növények (például nehézfémek) palántákat vagy gyökércsúcsokat, enyhén mossuk meg tiszta vízzel, és tegyük szűrőpapírra, hogy a felesleges vizet elvezetjük. A palántákat vagy a gyökérvégeket szobahőmérsékleten DAB festő munkafesték oldatba merítettük, és fénytől távol tartottuk 2-6 órán keresztül, amíg a pozitív rész sötétbarna nem lett, a többi része pedig szinte színtelen vagy a növény színét mutatta. maga. (A festési időt a növények fiatalságának és színfejlődésének megfelelően állítsa be)

3. Óvatosan távolítsa el a palántákat vagy leveleket csipesszel, merítse tiszta vízbe, és öblítse át oda-vissza 3-5-szer, tegye szűrőpapírra, hogy a felesleges vizet eltávolítsa, majd merítse 95%-os etanolba. 40 fokon 3-16 óráig. A cél az, hogy maguknak a növényi palántákról vagy levelekről eltávolítsák a klorofilt, és a színtelenítés során a friss 95%-os etanol sokszor cserélhető.

4. Csipesszel vegye ki a palántákat vagy leveleket, merítse tiszta vízbe és öblítse át oda-vissza 3-5-szer, helyezze szűrőpapírra a felesleges víz elszívása érdekében, majd tegye át a mintákat megfelelő mennyiségű DAB mintába. tartósító oldatot, és áztassa be őket 30 percig, majd készítsen fényképeket. A minták az oldatban szobahőmérsékleten egy hétig tárolhatók.

1. A DAB festő munkaoldat elkészítése után 4 fokon, fénytől védve tárolandó és egy héten belül felhasználandó. A tárolási idő túl hosszú, ez befolyásolja a színt.

2. Mivel a hidrogén-peroxid könnyen lebomlik, és bármilyen külső tényező a növényi stresszt hidrogén-peroxid termelésére ösztönözheti, a növényi mintákat a lehető leghamarabb frissen kell gyűjteni és megfesteni. Negatív és pozitív vak kontrollcsoport javasolt.

3. A lehető leghamarabb készítsen fényképeket, hogy elmentse az eredményeket a mintafestés után.

4. Viseljen laborköpenyt és eldobható kesztyűt működés közben.

Csak kutatási célra!

Népszerű tags: növényi hidrogén-peroxid festőfolyadék (dab), Kína növényi hidrogén-peroxid festőfolyadék (dab) gyártók, beszállítók, gyár