MagBind vírus DNS/RNS extrakciós készlet

 

Termék neve	Cat.No.	Spec.
MagBind Virus DNS/RNS extrakciós készlet	G3608-50T	50 T

 

 

A készletet különféle vírus DNS/RNS gyors izolálására tervezték szérumból, plazmából, vizeletből, sejttenyésztő táptalaj felülúszójából, vírustörzsből és fertőzött szövetekből. A cégünk által önállóan kifejlesztett szuperparamágneses gyöngyökön keresztül egy speciális pufferrendszer hatására a nukleinsav specifikusan adszorbeálódik a mágneses részecskék felületén, és hatékonyan öblíthetők le a fehérjék, sejtfragmensek és egyéb szennyező anyagok. Végül kiváló minőségű DNS/RNS nyerhető nukleázmentes vizes elúcióval. A kapott kiváló minőségű DNS/RNS közvetlenül felhasználható downstream PCR-ben, cDNS-szintézisben, RT-qPCR-ben és más molekuláris biológiai kísérletekben.

 

 

A proteináz K-t és a hordozó RNS-t nedves jéggel szállítják, és -20 fokon tárolják. A többi reagenst szobahőmérsékleten szállítják és tárolják; 12 hónapig érvényes.

 

 

Alkatrészszám	Összetevő	G3608-50T
G3608-1	MVL puffer	10 ml
G3608-2	Proteináz K	1 ml
G3608-3	Carrier RNS	50 μL
G3608-4	SweMag gyöngyök	1 ml
G3608-5	Puffer MPA	12 ml (18 ml vízmentes etanolt adunk hozzá felhasználás előtt)
G3608-6	MPB puffer	15 ml (60 ml vízmentes etanolt adunk hozzá felhasználás előtt)
G3608-7	Nukleázmentes víz	12 ml
Kézikönyv		Egy példány

 

 

1. Ha az MVL puffer és az MPA puffer kicsapódik, melegítse fel 37 fokra, és szobahőmérsékletre visszaállítva használja.

2. Kérjük, az első használat előtt adjon hozzá 18 ml vízmentes etanolt az MPA pufferhez és 60 ml vízmentes etanolt az MPB pufferhez.

3. A hordozó RNS alácsomagolható és -20 fokon tárolható az első használat előtt, és kerülni kell az ismételt fagyasztást és felengedést.

4. Kérjük, előzetesen hűtse le a darálót, ha darálóval köszörüli a szövetet.

5. Mágneses állványra van szükség, de ez a készlet nem tartalmazza.

 

 

1. Minták előkészítése:

a. Szérum, plazma, vizelet, sejttenyésztő tápközeg felülúszója és vírustörzs lízise: Mintavétel 10-200 μL szérumból, plazmából, vizeletből, sejttenyészet felülúszójából vagy vírustörzsből. A kezdeti 200 μl-nél kisebb mennyiséget 200 μL-re lehet pótolni PBS-sel vagy nukleázmentes vízzel.

b. A fertőzött szövet lízise: 10-20 mg friss vagy mélyhűtött fertőzött szövetből kell mintát venni, és 1,5 ml-es nukleázmentes centrifugacsövekbe mozgatni, amelyek 2-3 db 3 mm-es őrlőgyöngyöt tartalmaznak (ajánlott G0203), vagy speciális őrlőcsöveket (ajánlott HT{9) }}M). Azonnal helyezze a szövetet tartalmazó centrifugacsövet vagy őrlőcsövet folyékony nitrogénbe, majd alaposan őrölje meg a szövetet, hogy alacsony hőmérsékleten homogenizálódjon egy szövetőrlővel (ajánlott KZ-5F-3D, ha a szövet nem homogenizálják alaposan, ez befolyásolja a DNS/RNS hozamát és minőségét). Az őrlés után adjon hozzá 200 μL PBS-t vagy nukleázmentes vizet.

2. Adjon hozzá 200 μL MVL puffert, 20 μL proteináz K-t és 1 μL Carrier RNS-t. Alapos összekeverés után inkubálja 56 fokon 10 percig.

3. Adjon hozzá 200 μL vízmentes etanolt, keverje össze fejjel lefelé, majd adjon hozzá 20 μL SweMag Beads-et (a SweMag Beads-t használat előtt vortexelje, amíg egyenletesen el nem oszlik), fejjel lefelé többször, amíg a gyöngyök egyenletesen eloszlanak.

4. Állítsa szobahőmérsékleten 10 percig, és keverje 2-3 alkalommal pipettával vagy vortex keverővel, amíg a gyöngyök egyenletesen el nem oszlanak.

5. Helyezze a centrifugacsövet a mágneses állványra, és hagyja állni 30 másodpercig, amíg a mágneses gyöngyök teljesen adszorbeálódnak, majd óvatosan fordítsa meg a centrifugacsövet többször fel-le a mágneses állvánnyal, hogy lemossák a cső falán maradt mágneses gyöngyöket. . Ha tiszta, nyelje fel és dobja ki a felülúszót (hogy elkerülje az extrakció hatékonyságának befolyásolását, ne szívja ki a mágneses gyöngyöket).

6. Távolítsa el a mágneses állványt, adjon hozzá 500 μL puffer MPA-t, óvatosan fújja pipettával, amíg a mágneses gyöngyök egyenletesen el nem oszlanak, majd helyezze a centrifugacsövet a mágneses állványra, hagyja állni 30 másodpercig, majd óvatosan fordítsa felfelé a centrifugacsövet. és többször le a mágneses állvánnyal, hogy lemossák a csőfalon maradt mágneses gyöngyöket. Miután kitisztult, dobja ki a felülúszót (hogy elkerülje az extrakciós hatékonyság befolyásolását, ne szívja ki a mágneses gyöngyöket).

7. Távolítsa el a mágneses állványt, adjon hozzá 700 μL MPB puffert, fújja ki pipettával, amíg a mágneses gyöngyök egyenletesen el nem oszlanak, majd helyezze a centrifugacsövet a mágneses állványra 30 másodpercre, és óvatosan fordítsa fel és le a centrifugacsövet. a mágneses állvánnyal, hogy lemossák a cső falán maradt mágneses gyöngyöket, miután kitisztult, dobja ki a felülúszót (hogy elkerülje befolyásolja az extrakciós hatékonyságot, ne szívja ki a mágneses gyöngyöket).

8. Ismételje meg a 7. lépést.

9. Nyissa ki a centrifugacső fedelét, hagyja szobahőmérsékleten 5-10 percig, hogy az etanol teljesen elpárologjon.

10. Távolítsa el a mágneses állványt, adjon 50-80 μL nukleázmentes vizet a centrifugacsőbe, finoman fújja, amíg a mágneses gyöngyök egyenletesen eloszlanak egy pipettával, és álljon szobahőmérsékleten 3 percig.

11. Helyezze a centrifugacsövet a mágneses állványra, amíg a mágneses gyöngyök teljesen adszorbeálódnak, és a felülúszót egy új, nukleázmentes centrifugacsőbe abszorbeálják, hogy nagy tisztaságú DNS-t/RNS-t kapjanak.

 

 

1. Kérjük, használat előtt figyelmesen olvassa el a termék kézikönyvét.

2. Az extrakciós folyamatban a Carrier RNS hozzáadása miatt a mennyiség elektroforézissel vagy abszorptométerrel nem határozható meg.

3. A készlet által biztosított Carrier RNS az E. coliból származó RNS, amely elsősorban a nyomnyi nukleinsav visszanyerésének hatékonyságát javítja, és megakadályozza a nyom RNS lebomlását. Ha a PCR primerek nagy homológiát mutatnak a Carrier RNS-sel, a primerek újratervezhetők.

4. A mágneses gyöngyök könnyen kicsapódnak, és használat előtt vortexeljük őket, amíg jól el nem oszlanak.

5. A mágnesgyöngy szuszpenziónak kerülnie kell a fagyást a tartósítás során.

6. Mielőtt mágnesgyöngyöket adna a mintához, a mintát egyenletesen el kell keverni más reagensekkel.

7. Elúció előtt az etanolt teljesen elpárologtatni kell, hogy elkerüljük a visszamaradó etanol hatását a későbbi kísérletekre.

8. Biztonsága és egészsége érdekében viseljen laborköpenyt és eldobható kesztyűt.

 

Csak kutatási célra!

 

 

Népszerű tags: magbind vírus DNS/RNS extrakciós készlet, Kína magbind vírus DNS/RNS extrakciós készlet gyártók, beszállítók, gyár