2 X Gyors Pfus PCR Master Mix

Ez a Fast Pfus PCR Master Mix egy használatra kész PCR-premix, amely módosított Pfu DNS-polimerázt, dNTP-ket és optimalizált PCR-reakciópuffert tartalmaz 2-szeres koncentrációban rutin PCR-hez, telep-PCR-hez, PCR-hez komplex templátokkal és magas GC-templátokkal. A PCR amplifikációt csak a templát, a primerek és a ddH2O hozzáadásával végezhetjük úgy, hogy a Mix oldat koncentrációja 1× legyen. Erős erősítési képesség, gyors erősítési sebesség, kiterjesztési sebesség 5-15 s/kb-ig, nagy hűség, nagy specifitás, az erősítő termék lapos végű. Loading Dye került a termékhez, és az amplifikált termék közvetlenül felhasználható agaróz gél elektroforézis kimutatására.

Hajó nedves jéggel; Tárolás -20 fokon, 12 hónapig érvényes. Kerülje az ismételt fagyasztást-olvasztást.

1. Javasolt PCR reakciórendszer

a: Nagyobb mennyiségű templát növeli a nem specifikus PCR-termékek keletkezésének kockázatát. Kisebb mennyiségű sablon csökkenti az erősítés pontosságát. Ha a templát plazmid vagy bakteriofág, 50 ng-5pg hozzáadása javasolt 50 μL rnx-ben. Ha genomi DNS-t temptáltunk, 250 ng{5}}ng 50 μL rnx-hez adva javasolt. Ha a templát cDNS, hígítsa fel az eredeti cDNS-ét 2-100-szeresére, és a reakcióhoz hozzáadott hígított cDNS térfogata nem haladja meg a teljes reakciótérfogat 10%-át. Ha a templtae bakteriális folyadék vagy nyers kivonatminta, a reakcióhoz hozzáadott térfogat nem haladhatja meg a reakció teljes térfogatának 10%-át. A templát nagyobb mennyisége nem specifikus amplifikációhoz vezet. Kisebb mennyiségű templát általában alacsony PCR-amplifikációs hatékonysághoz vezet.

b: A végső primer koncentráció tartománya {{0}}.2-1.0 μM, és 0,4 μM ajánlott. A túl kevés primer alacsony amplifikációs hozamot vagy egyáltalán nem, a túl sok primer pedig nem specifikus amplifikációt eredményezhet.

c: Magas GC-tartalmú sablon esetén DMSO legfeljebb 10%-os teljes térfogattal.

2. Javasolt PCR amplifikációs körülmények

a: A 30 másodperces elődenaturálási idő a legtöbb hagyományos sablonhoz megfelelő; Az összetett sablonok legfeljebb 2 percig denaturálhatók.

b: Összefűzött primereket tartalmazó komplex templátok amplifikálásakor az annealing idő 30 másodpercig meghosszabbítható.

c: Az ajánlott kiterjesztési lépés: 5-10 s/kb 72 fokon egyszerű templátoknál, például plazmidnál, 10-15 s/kb rutin genomiális DNS-templátoknál, 15-30 s/kb összetett templátoknál .

1. Felhasználáskor kérjük felengedni és alaposan összekeverni, teljes felengedés után legalább 2 hétig 4 fokon stabilan tárolható, kerülje az ismételt fagyasztást és felengedést.

2. Biztonsága és egészsége érdekében viseljen védőszemüveget, kesztyűt vagy védőruházatot.

Csak kutatási célra!

Népszerű tags: 2 x gyors pfus pcr master mix, Kína 2 x fast pfus pcr master mix gyártók, beszállítók, gyár